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ELISA实验结果常见问题解决方案:样本值不佳

更新时间:2017-02-13   点击次数:224

ELISA实验结果常见问题解决方案:样本值不佳


ELISA实验结果常见问题:样本值不佳,结果重复性不好


ELISA实验标准曲线吸光值、梯度挺好,但是样本值不佳,样本浓度太低或太高,总结原因如下:

 
序号   可能原因   解决方法
1
  标曲选择不合适   选择最合适的标曲拟合。
2
  样本含量很低,低于灵敏度
  无法被检测到
  尝试浓缩样本或使用高敏ELISA试剂盒检测。
3
  样本含量很高,超过标曲   建议进行预实验摸索稀释倍数,确保样本OD值落在标曲范围内。


ELISA 实验结果重复性不好,可能的原因:

序号   可能原因   解决方法
1   微量加样不准确   保证微量加样的准确性和均一性,定期校准移液器。
2   样品不均一   加样前充分混匀样品,取样确保移液位置一致。
3   加样量不一致   样品稀释前应充分混匀,尽可能使用同一移液器并装紧吸嘴。
4   孔与孔之间的交叉污染   孵育后取下盖子小心操作,避免孔与孔的污染;封板膜不能重复使用。
5
  边缘效应
  
(外周孔显色较中心孔深)
  孵育时尽量100 rpm旋转混匀。
6   包被板表面遭到破坏   洗板加样时尽量小心,避免破坏板的包被表面。

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